PXD002591:一种测定位点特异性蛋白质O-GlcNAc糖基化动态的新型定量质谱平台
在过去的几十年中,人们发现蛋白质O-GlcNAc糖基化在细胞周期控制、代谢、转录调控和细胞信号传导中发挥基础性作用。然而,大规模确定体内GlcNAc动态的定量方法仍不易获得

基本信息
资源简介
PXD002591:一种测定位点特异性蛋白质O-GlcNAc糖基化动态的新型定量质谱平台
在过去的几十年中,人们发现蛋白质O-GlcNAc糖基化在细胞周期控制、代谢、转录调控和细胞信号传导中发挥基础性作用。然而,大规模确定体内GlcNAc动态的定量方法仍不易获得
【数据内容】
源站描述(机器翻译,仅供参考):在过去的几十年中,人们发现蛋白质O-GlcNAc糖基化在细胞周期控制、代谢、转录调控和细胞信号传导中发挥基础性作用。然而,大规模确定体内GlcNAc动态的定量方法仍不易获得。在此,我们开发了一种方法:通过己糖胺生物合成途径,由13C6-葡萄糖生成13C标记的UDP-GlcNAc,从而对蛋白质上的O-GlcNAc修饰进行同位素标记。该代谢标记与基于定量质谱的蛋白质组学相结合,用于确定位点特异性的蛋白质O-GlcNAc糖基化周转率。首先,利用苯硼酸固相萃取和无水DMSO,开发了一种高效的O-GlcNAc肽富集方法。GlcNAc的二醇与硼酸之间接近化学计量比的反应显著提高了富集效率。此外,我们的周转率动力学模型整合了代谢组学和蛋白质组学数据,从而提高了周转率估计的准确性。这种代谢标记方法的其他优势包括可用于体内应用、直接标记O-GlcNAc位点以及提高位点鉴定的置信度。仅关注核内定位的GlcNAc修饰蛋白,我们能够从HeLa细胞核提取物中鉴定出74种蛋白质上的159个O-GlcNAc位点,并测定来自21种蛋白质的24个O-GlcNAc肽的周转率。总体而言,我们发现O-GlcNAc糖基化周转率慢于已发表的磷酸化或乙酰化周转率。尽管如此,这些速率因所修饰的蛋白质和残基不同而有很大差异。我们相信,该方法可广泛应用于揭示不同生物状态下蛋白质O-GlcNAc糖基化的周转/动态,并将为位点特异性O-GlcNAc糖基化的重要性提供更多信息,使我们能够以位点特异性的方式研究这一关键修饰的时间动态。
【主题与分类】
主题标签:质谱数据、蛋白质组学、翻译后修饰、代谢标记、定量分析、动态监测、内分泌代谢、营养代谢病。本站分类:内分泌、营养和代谢疾病。
【获取与许可】
源站页面:https://ebi.ac.uk/pride/archive/projects/PXD002591
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数据集获取
源站:https://ebi.ac.uk/pride/archive/projects/PXD002591
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- 进入数据集详情页,按页面指引申请权限或直接下载;
- 部分平台提供 SDK,例如:
- OpenDataLab:
pip install openxlab后openxlab.dataset.get(...) - ModelScope:
pip install modelscope后modelscope download - 天池: 登录后页面提供直链下载
以源站「数据下载/使用文档」页面为准。
- OpenDataLab:
数据说明
在过去的几十年中,人们发现蛋白质O-GlcNAc糖基化在细胞周期控制、代谢、转录调控和细胞信号传导中发挥基础性作用。然而,大规模确定体内GlcNAc动态的定量方法仍不易获得。在此,我们开发了一种方法:通过己糖胺生物合成途径,由13C6-葡萄糖生成13C标记的UDP-GlcNAc,从而对蛋白质上的O-GlcNAc修饰进行同位素标记。该代谢标记与基于定量质谱的蛋白质组学相结合,用于确定位点特异性的蛋白质O-GlcNAc糖基化周转率。首先,利用苯硼酸固相萃取和无水DMSO,开发了一种高效的O-GlcNAc肽富集方法。GlcNAc的二醇与硼酸之间接近化学计量比的反应显著提高了富集效率。此外,我们的周转率动力学模型整合了代谢组学和蛋白质组学数据,从而提高了周转率估计的准确性。这种代谢标记方法的其他优势包括可用于体内应用、直接标记O-GlcNAc位点以及提高位点鉴定的置信度。仅关注核内定位的GlcNAc修饰蛋白,我们能够从HeLa细胞核提取物中鉴定出74种蛋白质上的159个O-GlcNAc位点,并测定来自21种蛋白质的24个O-GlcNAc肽的周转率。总体而言,我们发现O-GlcNAc糖基化周转率慢于已发表的磷酸化或乙酰化周转率。尽管如此,这些速率因所修饰的蛋白质和残基不同而有很大差异。我们相信,该方法可广泛应用于揭示不同生物状态下蛋白质O-GlcNAc糖基化的周转/动态,并将为位点特异性O-GlcNAc糖基化的重要性提供更多信息,使我们能够以位点特异性的方式研究这一关键修饰的时间动态。
数据加载示例(图像类)
from PIL import Image
import glob, os
files = (glob.glob(os.path.join(path, "**", "*.png"), recursive=True)
+ glob.glob(os.path.join(path, "**", "*.jpg"), recursive=True)
+ glob.glob(os.path.join(path, "**", "*.tif"), recursive=True))
print("图像文件数:", len(files))
img = Image.open(files[0]); print("尺寸/模式:", img.size, img.mode)
# torchvision Dataset 方式:
# from torchvision import datasets
# ds = datasets.ImageFolder(path) # 要求 子目录=类别
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