PXD002591:一种测定位点特异性蛋白质O-GlcNAc糖基化动态的新型定量质谱平台

在过去的几十年中,人们发现蛋白质O-GlcNAc糖基化在细胞周期控制、代谢、转录调控和细胞信号传导中发挥基础性作用。然而,大规模确定体内GlcNAc动态的定量方法仍不易获得

pride
2016-07-19 更新
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时间序列回归质谱数据蛋白质组学翻译后修饰代谢标记定量分析动态监测内分泌代谢营养代谢病
PXD002591: A novel quantitative mass spectrometry platform for determining site-specific protein O-GlcNAcylation dynamics

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创建/更新时间
2016-07-19

资源简介

PXD002591:一种测定位点特异性蛋白质O-GlcNAc糖基化动态的新型定量质谱平台

在过去的几十年中,人们发现蛋白质O-GlcNAc糖基化在细胞周期控制、代谢、转录调控和细胞信号传导中发挥基础性作用。然而,大规模确定体内GlcNAc动态的定量方法仍不易获得

【数据内容】

源站描述(机器翻译,仅供参考):在过去的几十年中,人们发现蛋白质O-GlcNAc糖基化在细胞周期控制、代谢、转录调控和细胞信号传导中发挥基础性作用。然而,大规模确定体内GlcNAc动态的定量方法仍不易获得。在此,我们开发了一种方法:通过己糖胺生物合成途径,由13C6-葡萄糖生成13C标记的UDP-GlcNAc,从而对蛋白质上的O-GlcNAc修饰进行同位素标记。该代谢标记与基于定量质谱的蛋白质组学相结合,用于确定位点特异性的蛋白质O-GlcNAc糖基化周转率。首先,利用苯硼酸固相萃取和无水DMSO,开发了一种高效的O-GlcNAc肽富集方法。GlcNAc的二醇与硼酸之间接近化学计量比的反应显著提高了富集效率。此外,我们的周转率动力学模型整合了代谢组学和蛋白质组学数据,从而提高了周转率估计的准确性。这种代谢标记方法的其他优势包括可用于体内应用、直接标记O-GlcNAc位点以及提高位点鉴定的置信度。仅关注核内定位的GlcNAc修饰蛋白,我们能够从HeLa细胞核提取物中鉴定出74种蛋白质上的159个O-GlcNAc位点,并测定来自21种蛋白质的24个O-GlcNAc肽的周转率。总体而言,我们发现O-GlcNAc糖基化周转率慢于已发表的磷酸化或乙酰化周转率。尽管如此,这些速率因所修饰的蛋白质和残基不同而有很大差异。我们相信,该方法可广泛应用于揭示不同生物状态下蛋白质O-GlcNAc糖基化的周转/动态,并将为位点特异性O-GlcNAc糖基化的重要性提供更多信息,使我们能够以位点特异性的方式研究这一关键修饰的时间动态。

【主题与分类】

主题标签:质谱数据、蛋白质组学、翻译后修饰、代谢标记、定量分析、动态监测、内分泌代谢、营养代谢病。本站分类:内分泌、营养和代谢疾病。

【获取与许可】

源站页面:https://ebi.ac.uk/pride/archive/projects/PXD002591

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    • ModelScope: pip install modelscope 后 modelscope download
    • 天池: 登录后页面提供直链下载
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数据说明

在过去的几十年中,人们发现蛋白质O-GlcNAc糖基化在细胞周期控制、代谢、转录调控和细胞信号传导中发挥基础性作用。然而,大规模确定体内GlcNAc动态的定量方法仍不易获得。在此,我们开发了一种方法:通过己糖胺生物合成途径,由13C6-葡萄糖生成13C标记的UDP-GlcNAc,从而对蛋白质上的O-GlcNAc修饰进行同位素标记。该代谢标记与基于定量质谱的蛋白质组学相结合,用于确定位点特异性的蛋白质O-GlcNAc糖基化周转率。首先,利用苯硼酸固相萃取和无水DMSO,开发了一种高效的O-GlcNAc肽富集方法。GlcNAc的二醇与硼酸之间接近化学计量比的反应显著提高了富集效率。此外,我们的周转率动力学模型整合了代谢组学和蛋白质组学数据,从而提高了周转率估计的准确性。这种代谢标记方法的其他优势包括可用于体内应用、直接标记O-GlcNAc位点以及提高位点鉴定的置信度。仅关注核内定位的GlcNAc修饰蛋白,我们能够从HeLa细胞核提取物中鉴定出74种蛋白质上的159个O-GlcNAc位点,并测定来自21种蛋白质的24个O-GlcNAc肽的周转率。总体而言,我们发现O-GlcNAc糖基化周转率慢于已发表的磷酸化或乙酰化周转率。尽管如此,这些速率因所修饰的蛋白质和残基不同而有很大差异。我们相信,该方法可广泛应用于揭示不同生物状态下蛋白质O-GlcNAc糖基化的周转/动态,并将为位点特异性O-GlcNAc糖基化的重要性提供更多信息,使我们能够以位点特异性的方式研究这一关键修饰的时间动态。

数据加载示例(图像类)

from PIL import Image
import glob, os

files = (glob.glob(os.path.join(path, "**", "*.png"), recursive=True)
       + glob.glob(os.path.join(path, "**", "*.jpg"), recursive=True)
       + glob.glob(os.path.join(path, "**", "*.tif"), recursive=True))
print("图像文件数:", len(files))
img = Image.open(files[0]); print("尺寸/模式:", img.size, img.mode)

# torchvision Dataset 方式:
# from torchvision import datasets
# ds = datasets.ImageFolder(path)  # 要求 子目录=类别

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