PXD008829:铜绿假单胞菌PA3904 pull-down联用LC-MS/MS

将表达 His-PAAR4 或 Flag-PAAR4 的大肠杆菌与假单胞菌细胞离心收获、裂解,合并裂解物并纯化 His-PAAR4 或 Flag-PAAR4

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2018-03-09 更新
浏览 29
其他Pseudomonas aeruginosa
PXD008829: Pseudomonas aeruginosa PA3904 pull down coupled to LC-MS/MS

基本信息

模态
其他
创建/更新时间
2018-03-09

资源简介

PXD008829:铜绿假单胞菌PA3904 pull-down联用LC-MS/MS

pETDUET His-PAAR4 和 pETDUET Flag-PAAR4 被转化至 BL21 E. coli DE3 并表达。等体积 PAO1 retS 培养至 OD600 2.0。将表达 His-PAAR4 或 Flag-PAAR4 的大肠杆菌与假单胞菌细胞离心收获、裂解,合并裂解物并纯化 His-PAAR4 或 Flag-PAAR4。洗脱样品与 SDS-loading buffer 混合、煮沸,于 12% SDS-PAGE 电泳 0.6 cm;考马斯染色与脱色后切取条带,用 LC-MS/MS 分析,仪器为 Orbitrap Fusion Lumos(来源 ebi.ac.uk)。

【数据内容】

源站描述(机器翻译,仅供参考):pETDUET His-PAAR4 和 pETDUET Flag-PAAR4 被转化到 BL21 E. coli DE3 中,并如上所述进行表达。将等体积的 PAO1 retS 培养至 OD600 为 2.0。通过离心收获表达 His-PAAR4 或 Flag-PAAR4 的 E. coli 和 Pseudomonas 细胞,并如上所述裂解。将两种菌的裂解液合并,并按之前的方法纯化 His-PAAR4 或 Flag-PAAR4。将洗脱样品与 SDS 上样缓冲液混合,煮沸,并在 12% SDS-PAGE 上电泳 0.6 cm。考马斯染色和脱色后,切下所得条带,用于 LC-MS/MS。

【主题与分类】

主题标签:Pseudomonas aeruginosa。本站分类:感染/感染性疾病。

【获取与许可】

源站页面:https://ebi.ac.uk/pride/archive/projects/PXD008829

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数据说明

pETDUET His-PAAR4 和 pETDUET Flag-PAAR4 被转化到 BL21 E. coli DE3 中,并如上所述进行表达。将等体积的 PAO1 retS 培养至 OD600 为 2.0。通过离心收获表达 His-PAAR4 或 Flag-PAAR4 的 E. coli 和 Pseudomonas 细胞,并如上所述裂解。将两种菌的裂解液合并,并按之前的方法纯化 His-PAAR4 或 Flag-PAAR4。将洗脱样品与 SDS 上样缓冲液混合,煮沸,并在 12% SDS-PAGE 上电泳 0.6 cm。考马斯染色和脱色后,切下所得条带,用于 LC-MS/MS。

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